Množení semeny (in-vitro)

Vegetativní, in-vitro výsevy ...
Odpovědět
mácha
Příspěvky: 419
Registrován: úte 20. srp 2013 13:58:43

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od mácha »

Ke starším příspěvkům- velká přesnost při měření objemů je zbytečná, třeba američtí pěstitelé často užívají medium Murashige- Skoog ředěné na polovinu. Důležité je ale pH, pro epifyty mezi 5 a 6 po sterilizaci teplem! Při sterilizaci v papiňáku pH ujede nahoru kvůli rozkladu agaru, samotný roztok mění pH jen nepatrně. Takže jednoduchý postup spočívá v použití práškového agaru (k dostání u dodavatelů pro gastro a taky levně). Nastavím roztok s agarem asi o 0.3 - 0.5 pH níž než je žádaná hodnota, za pořádného třepání odliju do lahvičky, sterilizuju v papiňáku 15 minut a nechám vychladnout. Pak rozbiju agar třeba vidličkou a změřím pH. Když hodnota nesedí, nastavím pH v roztoku se suspenzí agaru a opakuju postup.
pavelheger
Administrátor
Příspěvky: 3366
Registrován: úte 29. črc 2008 14:35:34
Bydliště: Senetářov. okr. Blansko
Kontaktovat uživatele:

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od pavelheger »

Aha, tak to možná bude ten důvod, proč u mě vyvažování pH téměř vždy skončilo fiaskem.
Díky za užitečný poznatek.
Pavel
virens
Moderátor
Příspěvky: 1242
Registrován: stř 30. črc 2008 13:04:11
Bydliště: Brno

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od virens »

mácha, je docela dobré používat pufr MES. Potom kolísání PH je docela minimální a drží se po několik měsíců v nastavených hodnotách. TAM je totiž ten hlavní problém.
mácha
Příspěvky: 419
Registrován: úte 20. srp 2013 13:58:43

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od mácha »

MES funguje, ale je drahé a pK je dost vysoko, 6.1 . O trochu líp pufruje citrát- je možné třeba v MS nahradit dusičnan draselný citranem draselným, mají skoro stejný obsah draslíku a pH upravit kyselinou citronovou. Jde také prostě přidat 1g citranu draselného / 1l MS a natitrovat citronovou, semenáčkům se to zamlouvá.
cheron
Příspěvky: 1063
Registrován: stř 28. říj 2015 19:16:45

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od cheron »

Som trochu zneistený - píše sa tu, že pH po sterilizácii stúpne nahor. Ale v mikrobiolog. skriptách píšu (na konci 18. strany), že pH klesne ... http://biomikro.vscht.cz/vyuka/lm/skriptalab.pdf
Kde je teda pravda ?
mácha
Příspěvky: 419
Registrován: úte 20. srp 2013 13:58:43

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od mácha »

Zkuste si to.
Uživatelský avatar
Paphio
Příspěvky: 2884
Registrován: pon 13. črc 2009 11:10:58
Bydliště: Hradec Králové
Kontaktovat uživatele:

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od Paphio »

cheron píše:Som trochu zneistený - píše sa tu, že pH po sterilizácii stúpne nahor. Ale v mikrobiolog. skriptách píšu (na konci 18. strany), že pH klesne ... http://biomikro.vscht.cz/vyuka/lm/skriptalab.pdf
Kde je teda pravda ?

V horkém roztoku pH stoupne.
cheron
Příspěvky: 1063
Registrován: stř 28. říj 2015 19:16:45

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od cheron »

Máte pravdu - najlepšie je to odskúšať ... ;)
Zdenka
Příspěvky: 7496
Registrován: pát 01. led 2010 19:06:51

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od Zdenka »

Tohle mi přijde hodně zajímavé, dost se toho dá odkoukat a pomocí překladače zjistit, ale pár podrobností z toho videa by bylo dobré vědět. Kdybyste někdo znal někoho, kdo vládne portugalštinou, bylo by to bezva:
http://orquideas.atualidadenews.com.br/ ... pria-casa/
mácha
Příspěvky: 419
Registrován: úte 20. srp 2013 13:58:43

Re: Množení semeny (in-vitro)

Příspěvek od mácha »

Podíval jsem se a složky receptu přeložil slovníkem.
100 ml kokosová voda
50 ml brambor
50 ml rajče
50 ml papaja
50 ml banán
50 ml kukuřice
50 ml meloun
50 ml teplá voda
7g agar
20g cukr krystal
umixovat v mixeru a doplnit vodou do 1 litru. V ideálním případě by pH mělo být 5,8. Všiměte si, že papaja, meloun i rajče mají odstraněná semena a kukuřice je nezralá. Důvodem je přítomnost inhibitorů klíčení v semenech. Provedení dezinfekce (nevím co bylo použito, ale nejspíš chlornan sodný čili naše Savo) je standartní, jak pro zralá tak pro nezralá semena. Zajímavý je filtr, kterým je přelepená dirka ve víčku lahve, mohlo by jít o normální sterilní náplast s polštářkem.
Odpovědět