Mám celú PDF publikáciu

cheron,
bohužel nevím co s tím. Já s tím nemám problém. Takřka vše klíčí a kontaminace z 50ks flašek co udělám 2-3 ks po výsevu .
Někdy mám potíž s růstem ale pokud vyměním víčko s ucpávkou a dám novou lehčí ucpávku tak se to obyčejně zlepší.
Fotky jsou tady na fóru.

Nevadí ... Každopádne ďakujem za ochotu a snahu !

Orchimaxu dám ešte šancu - predsa ho nevyhodím, keď už som musel na neho čakať 3 mesiace po objednaní
Čakám, až mi dozrie jeden semenník (malo by to byť odhadom v priebehu mesiaca) a potom spravím výsev - jak na Orchimax v plnej dávke podľa návodu, tak na vlastné médium a uvidíme, ako to dopadne. Možno sa tentokrát zadarí a orchimax prekvapí ...

Po dvou měsících vyrostla ve výsevu taková krásná plíseň. Vytáhl jsem ji z flašky ale věděl jsem , že je to marné. Už prorostla celým agarem. Ani vybrání jednotlivých protokormů se asi nepodaří. Opláchl a přendal jsem jich pár do nové flašky a uvidím. Myslím si, že to není sekundární plíseň ale nějaká nezničitelná při sterilizaci semen.

Protokormy sa mi podarilo zachrániť ex-vitro na vermikulite. Ale bolo to náročné - nie všetko prežilo. Väčšiu šancu majú tie s lístkami.

Inak 9.5. som robil výsev na orchimax a dom. médium - po 3 mesiacoch z toho nevzišlo naprosto nič. Domáce médium som trochu viac "prisolil" - vodivosť bola okolo 2000 uS. Z toho mi teda vyplýva, že vysoká vodivosť je nežiadúca Kontaminácia nulová ...

Pořídil jsem si základní vybavení pro práci s in vitro kulturami. Kdyby měl někdo zájem o množení semeny, rád bych to zkusil.

Kdysi se mi z tohoto podařilo dopěstovat rostliny na jemném substrátu. To, že semenáče plíseň nezahubila, dává určitou naději.. Tada tak10%.

Zkušenosti z desinfekce semen.
Už mnoho let používám 20x ředěné Savo originál. Naředím Savo vodovodní vodou, nasypu do nesterilní střílačky semena vypadaná z několik dní sušeného žlutého či prasklého semeníku na přeloženém papíru. Nasaju ředěné Savo a za občasného protřepání nechám působit 20-30 minut. Odstříknu nadbytek roztoku, semena jsou usazená buď na dně (lepší) nebo nahoře. Nasaju sterilní vodu z jogurtové skleničky, nechám usadit, odstříknu vodu a opakuju promytí. K usazeným semenům nasaju sterilní vodu v množství odpovídajícím kvantu semen a nakapu na 1/2 ředěné MS medium v jogurtových lahvích s vatou ve víku. Pozor, Paphia chtějí 5x až 7x ředěné MS a klíčí potmě dlouho, půl roku až rok. Dělám to ne v boxu, ale v koupelně nad Savem otřenou výlevkou, infekcí je minimálně. Přesazování chce ovšem box a dobře Savem otřené lahve se semenáčky. Rozhodující je správné pH výsevového media po sterilizaci, nejlíp rostou semenáčky které mají při přesazování pH 5.3. Ph se ovšem časem mění vlivem CO2 a spotřeby živin, medium po sterilizaci nastavuju na 5,4 až 5,6. Kdysi jsem zkoušel i jiné desinfekce, ale Savo čili chlornan sodný je bezkonkurenčně nejlepší.

Drobné triky k výsevům.

Vysévám do 1/2 MS do skleniček od jogurtu, víčko proražené průbojníkem a díra vycpaná vatou nebo molitanem. Desinfekce semen v injekční stříkačce 10-20 x řed. Savem originál, na 2 dcl kapka Jaru, 20-30 minut. Promytí semen vodou po Savu 2x. Umyvadlo otřené toaleťákem s tímtéž, ruce po lokty také. Ve staré čerstvě vyprané nebo vyžehlené košili (Savo ničí barvy) s krátkým rukávem. Jako přídavky k mediu se osvědčily pouze 20 ml/l směs aminokyselin pro umělou výživu pacientů a 2 ml kokosové vody /l, vyšší dávky jsem nezkoušel. Přídavky zrychlí růst. Aminokyseliny snižují změnu pH po klávování media, pokud máte možnost je také vhodný 1g/l MES nebo alespoň 0,5g/l citrinové kyseliny, úprava pH KOH , pH musí být 5-6 po klávování.